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甲醇和乙腈在反相液相色譜中作用的（介紹，靜電強(qiáng)度，選擇性，結(jié)論）
Release Time：2021-04-06甲醇和乙腈在反相液相色譜中作用的介紹
反相流動(dòng)相通常包含水和極性較小的有機(jī)溶劑（有機(jī)改性劑），以及諸如緩沖液，酸或堿之類(lèi)的添加劑。在反相狀態(tài)下，流動(dòng)相的水相組分的洗脫強(qiáng)度較弱，而有機(jī)相的洗脫強(qiáng)度較高。因此可以調(diào)節(jié)水和有機(jī)物的相對(duì)比例，以控制分析物的保留。多種有機(jī)溶劑適合用作反相液相色譜中的有機(jī)改性劑，盡管在實(shí)踐中，常規(guī)僅使用了少數(shù)幾種。在選擇有機(jī)溶劑時(shí)，必須考慮諸如與水的混溶性，極性，紫外線阻隔性，粘度和安全性等特性。每種有機(jī)改性劑都有其優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)在使用前加以考慮。例如，四氫呋喃（THF）和異丙醇（IPA）都可以使用，因?yàn)樗鼈兙峁┝烁呦疵搹?qiáng)度。但是，由于IPA的高粘度（導(dǎo)致較低的性能和較高的背壓），因此IPA的使用受到限制，而THF會(huì)降低泵的密封性以及PEEK管路和配件，并需要使用穩(wěn)定劑（例如BHT）來(lái)防止過(guò)氧化物的形成。丙酮是一種廉價(jià)的溶劑，多年來(lái)，乙腈和甲醇已成為許多反相應(yīng)用中選擇的兩種有機(jī)改性劑。兩種溶劑都可以與水完全混溶，并且與常見(jiàn)的流動(dòng)相添加劑和緩沖液兼容（盡管在有機(jī)成分較高的情況下使用緩沖鹽時(shí)應(yīng)格外小心）。兩種溶劑都有其優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，最終改性劑的選擇通常取決于應(yīng)用。例如，乙腈的成本明顯高于甲醇，而甲醇的毒性也較小。但是，乙腈的紫外截止值要比甲醇低（190 nm和205 nm），這使其更適合用于需要低UV檢測(cè)波長(zhǎng)的應(yīng)用中（但是請(qǐng)注意，對(duì)于LC，使用HPLC級(jí)或更好的溶劑很重要分析）。此外，乙腈/水混合物的粘度低于甲醇/水混合物，因此在LC色譜柱上產(chǎn)生的背壓要低得多。人們通常認(rèn)為這種較低的背壓是有利的，因?yàn)樗鼘?duì)LC系統(tǒng)組件和色譜柱施加的壓力較小，并提供了增加流速和減少運(yùn)行時(shí)間的余地。
甲醇和乙腈在反相液相色譜中作用的靜電強(qiáng)度
對(duì)于反相色譜，乙腈比甲醇具有更高的洗脫強(qiáng)度，因此，對(duì)于有機(jī)物與水等比例的樣品，保留的分析物保留時(shí)間較短。在此示例中，對(duì)于這些中性分析物的分離，使用甲醇/水可獲得大約1.7倍的保留時(shí)間。原則上，可以增加B中甲醇的比例，以獲得分離（即與乙腈/水混合物的溶出強(qiáng)度匹配）。確實(shí)，在最近的2008/9年度乙腈短缺期間，一些實(shí)驗(yàn)室試圖在流動(dòng)相中用甲醇代替乙腈。對(duì)于某些應(yīng)用程序，此方法可能會(huì)成功。盡管應(yīng)謹(jǐn)慎行事，因?yàn)檫x擇性和洗脫順序可能會(huì)發(fā)生較大變化。
甲醇和乙腈在反相液相色譜中作用的選擇性
乙腈和甲醇可用性最有用的方面之一是它們具有不同的溶劑特性。甲醇是質(zhì)子惰性的溶劑，而乙腈是質(zhì)子惰性的溶劑，并具有較強(qiáng)的偶極矩。這意味著在流動(dòng)相中使用的有機(jī)改性劑可以對(duì)色譜選擇性產(chǎn)生強(qiáng)大的影響。因此，改變流動(dòng)相的有機(jī)成分可以成為功能強(qiáng)大的方法開(kāi)發(fā)工具。使用甲醇和乙腈作為有機(jī)改性劑的相同梯度分離過(guò)程。在本例中，使用乙腈時(shí)會(huì)觀察到幾種共洗脫。當(dāng)使用甲醇時(shí)，會(huì)產(chǎn)生不同的選擇性，并且所有樣品組分都可以完全分離。對(duì)于某些分析物，相對(duì)保留的變化很大，并且觀察到洗脫順序完全顛倒。因此，強(qiáng)烈建議在方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中同時(shí)評(píng)估乙腈和甲醇，以確定最合適的溶劑并幫助優(yōu)化分離。由于甲醇和乙腈可以完全互溶，因此也可以將它們混合以微調(diào)分離。堿性分析物的梯度分離示例，其中作為有機(jī)改性劑的甲醇或乙腈均無(wú)法完全分離。通過(guò)將兩種溶劑與作為三元混合物的水共混，可以獲得中間選擇性并分離所有七個(gè)組分。
甲醇和乙腈在反相液相色譜中作用的結(jié)論
乙腈和甲醇在反相液相色譜中用作有機(jī)改性劑均有利有弊，最佳選擇取決于應(yīng)用。這兩種溶劑最重要的方面可能是它們彼此之間提供了完全不同的選擇性。因此，在開(kāi)發(fā)新的反相方法時(shí)，強(qiáng)烈建議對(duì)甲醇和乙腈進(jìn)行研究是一種有價(jià)值的方法。
