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鈣指示劑（Calcium Indicators）種類：

BIOFOUNT 開發(fā)了鈣指示劑系列探針，包括 Fluo-8®、Cal-520® 和 Calbryte™ 鈣指示劑，以及鈣通量測定，以通過強熒光信號和多種波長選項跟蹤鈣動員 從紫外線到紅外線。

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用于活細胞鈣成像的熒光AM酯衍生物指示劑：

在結(jié)合鈣時顯示光譜響應(yīng)的熒光指示劑使研究人員能夠通過使用熒光顯微鏡、流式細胞術(shù)、熒光光譜和熒光酶標(biāo)儀來研究細胞內(nèi)游離鈣濃度的變化。為了便于檢測細胞內(nèi)鈣動員并促進被動擴散，乙酰氧基甲酯 (AM 酯) 官能團附著在鈣指示劑的核心結(jié)構(gòu)上。這增加了指示劑的疏水性，使其能夠輕松穿透完整的質(zhì)膜，并通過最大限度地減少非特異性背景熒光來提高指示劑的靈敏度，因為 AM 酯共軛指示劑基本上是非熒光和無活性的。
一旦探針進入活細胞并且只有在細胞內(nèi)酯酶去除 AM 酯官能團后，活性才開始。一旦被激活，探針通過螯合檢測鈣，并通過產(chǎn)生與鈣濃度相關(guān)的熒光信號來響應(yīng)。 Fluo-8®, AM (Cat No.HCM0029B), Cal-520®, AM (Cat No.HCQ000597) 和 Calbryte™ 520, AM () 等指示劑已廣泛用于鈣成像、鈣通量用于藥物發(fā)現(xiàn)的檢測和基于細胞的高通量篩選 (HTS) 檢測。鈣指示劑與流式細胞儀、熒光顯微鏡和熒光微孔板平臺兼容。除了提供熒光和發(fā)光鈣指示劑外，我們還提供多種非熒光鈣信號分子和螯合劑，用于測量和操縱細胞內(nèi)和細胞外鈣。

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單波長鈣指示劑

單波長鈣指示劑廣泛用于監(jiān)測鈣動員、鈣信號的空間動力學(xué)成像，以及通過 GPCR 對激動劑刺激和拮抗劑抑制的信號進行基于 HTS 細胞的藥理學(xué)篩選。 這些指標(biāo)在飽和鈣水平下表現(xiàn)出顯著的鈣依賴性變化，而不會改變它們的吸光度或發(fā)射波長。 我們開發(fā)了多種新型鈣指示劑，包括 Fluo-8® 系列、Cal-520® 系列和 Calbryte™ 系列，旨在通過最亮的熒光信號以及一系列波長和親和力選項來追蹤鈣動員 滿足很多應(yīng)用。

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單波長鈣指示劑的主要特點

※ 改進的信號背景比。
※ 大大增強細胞保留。
※ 用于活細胞鈣分析的細胞滲透形式（與成像、流式細胞術(shù)和微孔板測定兼容，例如 HTS）。
※ 用于通過顯微注射、貼片吸管或胞飲加載加載的細胞不滲透形式。
※ 紫外 (UV)、紫羅蘭色和可見光可激發(fā)格式。
※ 低、中和高親和力格式提供了滿足許多應(yīng)用的靈敏度范圍。比例鈣指標(biāo)

圖-1.HeLa cells loaded with Fluo-4 in the presence (+) or the absence (-) of 500 nM of the Ca²?  ionophore ionomycin.

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雙波長鈣指示劑（Ratiometric Calcium Indicators）：

雙波長指示劑 與單波長指示劑相比，雙波長指示劑 具有獨特的光譜特性，可響應(yīng)結(jié)合鈣而觸發(fā)。當(dāng)與鈣結(jié)合時，比率指示劑的最佳吸光度或發(fā)射波長強度會發(fā)生變化。例如，雙激發(fā)鈣指示劑 Fura-2、AM 和 Fura-8™、AM 在結(jié)合或不含鈣時表現(xiàn)出兩個峰值激發(fā)波長。當(dāng)分別在鈣結(jié)合和無鈣峰值激發(fā)波長下激發(fā)時，鈣濃度的增加會導(dǎo)致雙激發(fā)指示劑的熒光發(fā)射強度增加和減少。

雙波長指示劑的主要特點
※ 雙波長測定可準(zhǔn)確測量細胞內(nèi)鈣濃度；
※ 最大限度地減少不均勻染料加載、染料泄漏、光漂白和不同細胞厚度的影響（在混合群體中很常見）；
※ 提供更可靠和可重復(fù)的結(jié)果；
※ 可作為透膜 AM 酯（與成像、流式細胞術(shù)和微孔板檢測兼容，例如 HTS）；
※ 可作為不透膜鹽衍生物，通過顯微注射、貼片吸管或胞飲加載加載。

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