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支原體去除劑的使用方法,工作濃度,對細胞有影響嗎?

Release Time:2022-10-13

支原體去除劑的工作濃度:
1. 將支原體清除劑添加到被支原體污染的細胞培養(yǎng)物中,濃度建議為5µg/ml,并培養(yǎng)1周;
2. 只有當推薦濃度對去除支原體無效時,才能將支原體去除劑濃度提高至10µg/ml;
3. 對于培養(yǎng)基更換或培養(yǎng)物轉移(傳代),使用含有相同濃度支原體清除劑的培養(yǎng)基;
4. 在不使用支原體清除劑的情況下轉移細胞培養(yǎng)物數(shù)次,并確認污染支原體沒有再生。
支原體去除劑產(chǎn)品HCQ001000


支原體清除劑注意事項(細胞影響):

1. 如果不能去除血清或胰蛋白酶中的支原體,可以將濃度為5µg/ml的支原體清除劑添加到培養(yǎng)基中,以防止接觸這些產(chǎn)品的細胞培養(yǎng)物受到污染;
2. 支原體清除劑自發(fā)貨之日起保質期長達5年,在室溫下也很穩(wěn)定,但應避光以防分解;
3. 支原體清除劑的細胞毒性較低,但是,當用支原體去除劑處理時,高度受支原體污染的細胞培養(yǎng)物可能會表現(xiàn)出細胞特性的改變或對細胞毒性抗生素的敏感性,因此,在這些情況下,建議在處理后檢查預期的細胞特性。
支原體清除劑案例數(shù)據(jù)
下表顯示感染水平、細胞類型和支原體菌株可能會影響特定結果。我們鼓勵研究人員將此數(shù)據(jù)作為有用的指南,以指示其特定細胞系和支原體菌株所需的有效支原體清除劑濃度。
支原體清除效果-自發(fā)性感染
MRA濃度 (ug/ml) 天數(shù)
    0 7 14 21
Human-derived cell-A 3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + - + +
  0 + + + +
Human-derived cell-B 7.8 + - - -
  3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + + + +
  0 + + + +
(+)=支原體陽性,(-)=支形體陰性,(天*)=培養(yǎng)階段的支原體狀態(tài)(天)。
參考文獻:

1. Molla Kazemiha V. et al. 2011. Efficiency of Plasmocin on various mammalian cell lines infected by mollicutes in comparison with commonly used antibiotics in cell cultures: a local experience. Cytotechnology. Dec; 63(6):609-20.
2. Uphoff C. C. et al., 2012. Treatment of mycoplasma contamination in cell cultures with Plasmocin. J Biomed Biotechnol. 2012:267678.
3. Rongvaux A. et al., 2014. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nat Biotechnol. 32(4):364-72.
4. Baronti C. et al., 2013. Mycoplasma removal: simple curative methods for viral supernatants. J Virol Methods. 187(2):234-7.
5. Deng F. et al. 2012. Generation of induced pluripotent stem cells from human Tenon's capsule fibroblasts. Mol Vis. 18:2871-81.
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