成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán)素法)

產(chǎn)品詳細介紹：
成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四 環(huán)素法):成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色液(四環(huán) 素法)產(chǎn)品簡介：骨代謝是破骨細胞骨吸收與成骨細胞骨形成的動態(tài)平衡過程。成骨細胞負責骨基質(zhì)的合成、分泌、礦化，是骨重建激活或終止的控制者，它在骨組織的創(chuàng)傷修復、骨組織的生長發(fā)育、骨量平衡中起著重要作用，是骨質(zhì)疏松、骨折等骨病研究的主要焦點。成骨細胞分化是其主導骨形成的前提與基礎。在成骨分化過程中，其基本的生物學特征是骨基質(zhì)合成、分泌、礦化及成熟，而礦化結(jié)節(jié)是成骨細胞分化成熟的標志，同時也是成骨細胞行使成骨功能的主要形態(tài)學表現(xiàn)，觀察成骨細胞的礦化結(jié)節(jié)是研究成骨細胞分化的生物實驗中常用手段之一。成骨細胞礦化結(jié)節(jié)染色生物實驗中常用方法有四環(huán) 素法和茜素紅S法，四環(huán) 素染色法是利用四環(huán) 素與礦化結(jié)節(jié)中的鈣鹽形成熒光的磷酸復合物，可用熒光顯微鏡觀察。
自備材料： 1、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS,無鈣鎂) 2、培養(yǎng)基 3、蒸餾水 4、熒光顯微鏡 操作步驟(僅供參考)： 1、成骨細胞經(jīng)培養(yǎng)，胰 酶消化，接種培養(yǎng)于6孔板中，每孔有1x105個細胞。 2、培養(yǎng)基中添加1%-2%四環(huán) 素溶液，細胞連續(xù)觀察、換液，培養(yǎng)14天。 3、小心吸除培養(yǎng)液，磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次3min。 4、加入足量Ob固定液固定15min。 5、磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次3min。 6、加入DAPI染色液染色5-8min。 7、輕輕吸除染色液,用磷酸緩沖鹽溶液(1×PBS)洗滌2次,每次3min。 8、直接在熒光顯微鏡快速觀察，或抗熒光封片劑封片后再觀察。 注意事項： 1、四環(huán) 素溶液為無菌溶液，可以一次性分裝小份保存，注意避免染菌；使用時常溫溶解后與培養(yǎng)基按1:100比例混合后使用。 2、Ob固定液宜揮發(fā)，開啟后應密封保存。 3、DAPI染色后應盡快觀察，以免熒光消失，影響觀察。也可以用抗熒光淬滅封片劑處理。 4、DAPI不宜反復凍融，否則容易失效。且對人體有刺激性，請注意做好防護。 5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 有效期： 6個月有效。